Page 132 - 动物生物技术与繁殖研究
P. 132
动物生物技术与繁殖研究
Research on Animal Biotechnology and Reproduction
速度比体内受精胚胎慢,因此在克隆胚胎的移植中通常建议选择发情时间(以出
现压背静立反应为准)晚于克隆胚胎激活时间的母猪作为受体。Koo 等(2010)
统计了 500 头受体母猪的发情时间以及胚胎移植时的排卵情况,发现将激活的克
隆胚胎(不经过体外培养)移植到排卵前的受体母猪比移植到排卵后的受体母猪
有着更高妊娠率和分娩率,这进一步证明选择发情时间晚于克隆胚胎激活时间的
母猪更有利于胚胎受孕。卫恒习等(2012)进一步研究了发情和克隆胚胎激活的
时间间隔对克隆效率的影响,发现发情时间晚于克隆胚胎激活时间 24h 的受体母
猪表现出最高的克隆效率,但是当发情时间晚于胚胎激活时间 36h 以上时,未能
得到克隆个体。因此推荐选择受体母猪自然发情的时间在胚胎激活后 0~36h 内的
母猪作为克隆胚胎受体母猪。
综合以上研究结果,推荐选择健康状况良好、无畸形、发情规律、胎龄在
2~4 胎之间,发情时间在克隆胚胎激活之后 0~36h 内的经产母猪作为胚胎移植受
体。不过在实际操作中,使用经产母猪的成本较高,而且经产母猪腹部血管较为
丰富,进行胚胎移植手术时易出血,造成术后粘连的可能性较大。因此,建议在
进行胚胎移植时,综合考虑实际条件及研究目的,选择符合条件的受体母猪进行
胚胎移植。
(二)猪胚胎移植操作方法
1. 非手术法
目前常用于猪胚胎移植的方法有非手术法、腹腔镜微创手术法以及开腹手
术法等三种方法(曹峥,2013)。非手术法胚胎移植是通过特殊的导管,将胚胎
从子宫口一直输送到子宫角。该方法具有无需手术、应激反应小、移植受体可重
复利用等优点,早在 1968 年就有成功妊娠的报道(Day 等,1968),但猪的非
手术胚胎移植法到目前为止仍然尚未规模化应用。其主要原因是猪子宫的生理结
构较为复杂,子宫颈褶皱多,颈环开口小,且不位于中心位置,因此在实际操作
中很难将胚胎移植导管顺利插入子宫中。Galvin 等(1994)发明了一种较为实用
的非手术胚胎移植器械,使得分娩率达到 40%,窝均产仔 7 头以上,取得了猪
非手术胚胎移植技术的重大突破。2004 年,西班牙穆尔西亚大学又开发出一种
可深入到子宫角的非手术胚胎移植器械及移植方法 NsDU-ET(Nonsurgical Deep
Uterine-embryo Transfer),NsDU 移植法可在后备猪或经产猪中达到 70.8% 的分
娩率,且窝均产仔数达 6.9 头以上(Martinez 等,2004)。后续的研究表明,对
118