Page 127 - 动物生物技术与繁殖研究

第五章 动物生物技术应用

工授精，或在 72、84、96h 应用 HCG 或 GnRH 促进排卵。对奶牛可用的超排方
法很多。比如超排前注射雌二醇或者阴道抽取优势卵泡。这些方法的目的是获得
更多可用胚胎。

（二）受体处理
观察到供体自然发情后，应同步对受体进行处理。供体牛和受体牛的比例
一般为 1 ∶ 6~8。受体要选择体格大，膘情好，繁殖机能正常的适繁健康母牛。
在移植前 6~8 周，对受体母牛逐头注射 VA、VB、VD、VE 针剂，补充微量元

素。在供体首次注射 PGF2α12h 之前受体应注射 PGF2α，受体会与供体同期排
卵，但通过比较，供体与受体注射 PGF2α相差±1d 比较好。超排率可以达到
75%~90%，但 20%~30% 超排的母牛所产胚胎质量不好。使用 FSH 可以获得高
质量的胚胎（每次能冲洗出 0~20 个胚胎）。每次收集胚胎平均能获得 5~7 个高

质量的胚胎，即可认为是满意的商业结果。
（三）胚胎采集和处理
可在发情周期第 7 天即胚胎定植子宫时进行胚胎采集。在采集胚胎之前，
超排之后供体母牛触诊子宫可摸到黄体。从子宫液中采集胚胎方法如下：5~7mL

利多卡因硬膜外腔麻醉；使用肥皂或消毒剂洗净外阴，用量依据动物及其子宫颈
大小，将安装有金属杆的导尿管插入阴道，用伸入直肠的触诊手臂将导尿管导入
子宫颈；插入子宫颈后，将导尿管深入到一侧子宫角上 1/3 处；取出导尿管里的
金属杆，管口充满 15~20mL 空气，空气量与子宫角大小有关，也与品种、年龄、

胎次等有关；子宫颈中含有冲洗液，该液体富含抗生素及牛血清白蛋白，有些还
有表面活性剂以减少胚胎形成泡沫；用冲洗液冲洗子宫角，每次 25~50mL，少
量重复多次，将冲洗液导入胚胎滤器，可持续冲洗子宫角，或使用 1~2L 冲洗液
连续冲洗子宫；冲洗完成后，冲洗液会流入胚胎滤器中；胚胎滤器送到实验室后，

应将其内容物放入检查盘中，可在 10 倍解剖显微镜下观察。将所有观察到的胚
胎移入另一个干净培养皿中，培养皿中有含有 10%~20% 胎牛血清或 0.4% 牛血
清白蛋白的缓冲液。然后在 40~60 倍的高倍镜下观察胚胎，依据胚胎形态、发育
程度（未受精卵母细胞、早期桑葚胚、紧密桑葚胚、胚泡、扩张胚泡、孵出胚泡

等）、质量（优秀、良好、一般、差劣、变质）进行分类。质量判定依据胚胎的
完整性、胚胎发育情况、细胞质颜色、细胞退化、卵裂球数量、卵周隙距离和胚
胎大小等形态特征进行评估。只有中等、良好或优秀的胚胎可以移植；至少清洗

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