Page 126 - 动物生物技术与繁殖研究
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动物生物技术与繁殖研究
Research on Animal Biotechnology and Reproduction
发育效率,其中人克隆胚胎囊胚率提高了近 2.5 倍(90.3% 和 26.o%);Liu 等研
究表明,过表达 H3K9me3 去甲基化酶 Kdm4e 提高了牛胚胎整体转录水平、囊胚
形成率及克隆效率。此外,H6rmanseder 等发现人和蟾蜍供体细胞转录活性记忆
基因(On Memory Genes)富集的 H3K4me3 修饰是一种 SCNT 特异的表观遗传
重编程障碍,向蟾蜍一细胞胚胎注射 H3K4me3 去甲基化酶 Kdm5b 提高了蟾蜍
核移植胚胎转录重编程效率;Zhang 等利用 MM-102 抑制猪克隆胚胎 H3K4me3
甲基转移酶矫正了胚胎激活阶段和囊胚阶段异常的基因转录模式。因此,通过降
低 SCNT 特异的重组抵抗区域 H3K9me3 和 H3K4me3 甲基化水平进而提高克隆
效率,在哺乳动物物种上表现出了一定的保守性。
第三节 动物胚胎移植
一、牛的胚胎移植技术
(一)激素处理
对牛进行单个胚胎的收集,通常在对超排供体母牛进行激素处理后,再进
行大量的胚胎移植。在牛,有两种超数排卵(超排)技术:一种是在发情期第
10 天肌内注射 PMSG2000~2500U,之后 2~3d 每隔 12~24h 注射 2 次前列腺素
PGF2α。发情牛需做直肠检查,以确认卵泡,若在发情后 1.5d 以后排卵的不能
用作受体牛。
使用 PMSG 的超排效果强于 FSH,但使用 FSH 得到的胚胎质量却更高,所
以商业上常使用 FSH 进行超排。商业应用的 FSH 来自猪脑垂体提取物,混有
LH。然而如果混有过多 LH 干扰 FSH 的最佳超排效果,但是少量的 LH 反而更
有利于 FSH 的超排效果。
据报道称,一次性注射 FSH 可以获得满意的结果,但应连续肌内注射
FSH4~5d,每日 2 次为最佳。商业用 FSH 用生理盐水稀释到 20mL,然后连续使
用 4~5d。使用 FSH 注射 4d 的方法是:第 1 天 4mL/ 次,2 次 /d;第 2 天 3mL/ 次,
2 次 /d;第 3 天 2mL/ 次,2 次 /d;第 4 天 1mL/ 次,2 次 /d,总量为 20mL。出
现发情后第 10 天应用 FSH。应用 FSH 后第 3 天或第 4 天注射 PGF2α,12h 后
重复 1 次。36~48h 后出现发情,发情开始后 12 及 24h 观察体温变化,以进行人
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