Page 76 - 动物生物技术与繁殖研究

动物生物技术与繁殖研究
Research on Animal Biotechnology and Reproduction

7. 纳米 PCR
该技术是将纳米金属颗粒添加到普通 PCR 反应中，使反应体系热导性更强，
PCR 反应更快，可提高反应的特异性，消除非特异性扩增，提高扩增产物产量，

纳米 PCR 技术可使非洲猪瘟病毒检测的灵敏度增加至 1000 倍。
8. 套式 PCR
套式 PCR 是先用外套引物进行一次扩增，再用内套引物对扩增产物进行第
二次扩增，提高扩增的敏感性，该方法可从非洲软蜱中检测出非洲猪瘟病毒，可

用于筛查不同种类蜱体内的非洲猪瘟病毒。
9. 实时荧光定量 PCR
实时荧光定量 PCR 技术，是在 PCR 体系中加入荧光基团，利用荧光信号实
时监测 PCR 反应过程，最后通过标准曲线对未知模板进行定量分析。该技术与

常规 PCR 相比较，检测过程简化，可对多个样品进行同时检测，检测的速度更快、
灵敏度更高，并且特异性强、自动化程度高，有效解决常规 PCR 污染等问题。
10. 等温扩增技术
等温扩增技术是核酸体外扩增技术，其始终维持在恒定温度进行反应。反应

过程无需精密的仪器，具备恒温装备即可，并且操作简便，反应时间短。不足的
是缺乏热循环中的变性、退火等程序，易出现假阳性，仅适用于疾病的初步筛查，
在一定程度上限制了该技术的应用。且检测试剂盒中酶的成本较高，造成单个样
品检测费用比普通荧光 PCR 高。

（二）血清学检测
1. 酶联免疫吸附试验
酶联免疫吸附试验（ELISA）是血清学检测方法中应用最广泛的检测技术，
具有快速、灵敏、成本低、特异性高、准确性高等特点，适用于大规模样品的排

查、疫病监测以及自动化血清学检测。一般情况下，国内外常用 p30/p32、p54、
p72、p73 等作为检测 ASFV 抗体的蛋白，该方法可通过这些蛋白直接检测出较
低或中等毒力感染猪抗体。王彩霞等以 ASFVp72 蛋白为包被抗原，建立阻断
ELISA 方法检测猪血清中抗 ASFVp72 蛋白的抗体，对 ASFV 阳性血清灵敏度最

低为 1 ∶ 128，具有较高的特异性、敏感性和良好的重复性。
2. 胶体金试纸检测技术
胶体金试纸检测技术是将特异性抗原或抗体与胶体金结合，形成胶体金免疫

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