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李路论文集
Collected Papers by Li Lu
扩增、传代乃至表达。细菌质粒、噬菌体和动植物病毒是 3 种最常用的 DNA 载体。
这些载体可分为克隆载体和表达载体，其中表达载体又分胞内表达和分泌表
达两种。根据载体进入的受体细胞不同，又分为原核细胞和真核细胞表达载体。
在基因工程操作中，根据运载的目的 DNA 片段大小和将来要进入的宿主需要选
用合适的载体。
质粒和噬菌体载体只能在细菌中繁殖，不能满足真核 DNA 重组需要。感染
动物的病毒可改造用作动物细胞的载体。由于动物细胞的培养和操作较复杂、花
费也较多，因而病毒载体构建时一般都把细菌质粒复制起始序列放置其中，使载
体及其携带的外来序列能方便地在细菌中繁殖和克隆，然后再引入真核细胞。目
前病毒载体常用者有改造来自猴肾病毒 SV40（simian virus 40）、逆转录病毒和
昆虫杆状病毒等，使用这些病毒载体的目的多为将目的基因或序列放入动物细胞
中表达或试验其功能，或作基因治疗等。
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人类基因组十分庞大，约含 4×10 bp，建立和 筛选人的基因组文库，要求
有容量更大的载体，酵母人工染色体（yeast artificial chromosome，YAC）载体
的研究和应用满足了这个要求。YAC 含有酵母染色体端粒（telesome）、着丝点
（centromere）及复制起点等功能序列，可插入长度达 200~500kb 的外源 DNA，
导入酵母细胞可以随细胞分裂周期复制繁殖供作克隆，成为人类基因组研究计划
的重要工具。
现在分子生物学使用的质粒载体都已不是原来细菌或细胞中天然存在的质
粒，而是经过了人工改造。从不同的试验目的出发，科研人员设计了各种不同类
型的质粒载体，近年来发展很快，新的有特定用途的质粒不断被创建。
除常用的大肠杆菌质粒载体外，近年来发展了许多人工构建的能用于微生物、
酵母、植物等的质粒载体，还有含有不止一个 ori、能携带插入序列在不同种类
宿主细胞中繁殖的载体，被称为穿梭载体（shuttle vectors）。
2 DNA 载体的数据分类及查询系统介绍
随着生物技术的不断发展和试验的不同需求，各种用途不同的载体层出不穷，
有些载体虽然有相同的用途，但是载体自身携带的酶切位点各不相同，为了更好、
更充分地利用这些载体为试验服务，本研究设计了 DNA 载体的数据分类及查询
系统软件。此款软件不但能将实验室现有的载体统计成一个数据库，而且能对这
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