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动物生物技术与繁殖研究
Research on Animal Biotechnology and Reproduction
牛患病后精神沉郁、体温升高、呼吸困难、腹泻、咳嗽、粪便带血,往往在 2~6
天内发生死亡。羊感染弓形虫可引起眼病、脑炎及子宫炎和胎盘炎。羔羊发病后
消瘦、贫血、持续高热、生长缓慢;怀孕母羊感染后产死胎、弱仔或流产,偶见
产木乃伊胎。多数成年羊为隐性感染,母羊和羔羊都可因呼吸系统和神经系统症
状而死亡。
二、动物弓形虫检测方法
(一)病原学检测
病原学检查常用的方法包括镜检法和接种法。前者主要是根据样本(肺、肝、
淋巴结或体液、脑脊液等)特性,选择涂片、固定或染色等方式通过显微镜观察
结果;后者是将样本经处理后通过接种至动物、鸡胚或细胞(如 Hela、Vero)等
进行培养,而后检测弓形虫的方法,这两种方法虽然不适合大批量样本的快速检
测,但操作较为简单,结果直观可靠,在动物弓形虫的诊断及预防中发挥了重要
作用。Khademvatan S 等以显微镜直接涂片检查了伊朗 230 只啮齿动物的弓形虫
寄生情况,结果显示有 1 例感染。Atasever A 等使用血清为弓形虫阳性的鹌鹑组
织接种小鼠,并顺利从感染小鼠的腹膜液中分离并鉴定出弓形虫。在弓形虫病的
检测实践过程中,传统病原学检测方法因费时、费力以及检出率低等原因,已无
法满足高效、快速检测人和动物弓形虫感染的需求。
(二)血清学检测
血清学方法是 20 世纪实验室检测弓形虫的首选和最常用的方法。该方法主
要使用弓形虫特异性抗原,通过测定宿主感染后体内相应抗体(IgA、IgM、IgG
和 IgE)进行判定。大多数血清学方法使用弓形虫裂解物抗原(TLA)、小鼠或
组织培养物中的速殖子抗原作为天然抗原。但是,制备这些抗原所需的实验室条
件及技术要求各不相同,且制备费时、成本较高以及存在感染风险等问题不容
忽视。
1. 萨宾 - 费尔德曼染色试验(Sabin-Feldman Dye Test,SFDT)
Sabin 和 Fedman1948 年首次提出 SFDT,利用活的弓形虫滋养体能被碱性美
蓝染成蓝色的特性,以加入致活剂和免疫血清(抗体)后不着色或着色很淡为判
断阳性的依据,可用于早期检测,被认为是弓形虫感染血清学检测的“金标准”,
很多学者运用 SFDT 法对不同动物进行过弓形虫检测。Chadwick E A 等通过该方
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