Page 105 - 动物生物技术与繁殖研究

第四章 动物寄生虫病防控

体一些完整的蛋白结构和抗原表位，由于其失去了感染能力，常常加入佐剂以提
高免疫效果，免疫保护效果较差。Stanley 和 Saavedra 等先后证明弓形虫灭活疫
苗所产生的免疫保护效力较差，无法很好地保护动物抵御弓形虫感染，遂对于该

类疫苗研究较少。
2. 弱毒活疫
目前国内外对弓形虫弱毒虫株疫苗的研究主要基于 TS-4、T-263、S48 这三
类突变弱毒虫株。TS-4 是一种对温度敏感的弓形虫突变株，在体外 40℃条件下

无法生长。将 TS-4 接种于包括小鼠在内的多种动物，均获得了抗致死性攻击的
免疫保护力，因为 TS-4 诱导机体所引产生的 IFN-γ，是小鼠在急性感染弓形虫
情况下存活所必需的。T-263 是一种化学诱导的弓形虫突变株，具有很强的免疫
原性且丧失了在组织内形成包囊的能力，因此在切断弓形虫传播途径方面具有

重要意义。然而，目前并不清楚卵囊是在虫体发育的哪个阶段停止生长了，在
Dubey 等研究中，给 4 只猫投喂含有 T-263 包囊的组织，然后检测弓形虫在肠上
皮侵染阶段的感染和卵囊的产生状况。2 只猫在接种后 5 天和 7 天分别进行检测，
在肠上皮未发现卵囊，但发现肠上皮中存在未成熟和成熟的裂殖子（D 型和 E 型）

以及雄雌配子。剩余的 2 只猫在投喂后 3~14 天并没有检测到卵囊，但经改良凝
集试验检测出 1 ∶ 400 的弓形虫抗体滴度，结果表明，T-263 虫株在猫体内卵囊
形成过程中存在缺陷。S48 虫株最初是由新西兰一个流产羊胎中分离所得，经实
验室传代 3000 代获得的一株弱毒虫株。S48 虫株在鼠体内已经失去了形成组织

包囊和卵囊的能力。Toxovax 便是由 S48 株制备的唯一一类在新西兰、英国等欧
洲国家获得批准的商业疫苗，该疫苗可用来减少绵羊的流产。由于目前对弱毒株
S48 速殖子的分子基础还未完全了解，且自发突变可能随时使弱毒株毒力返强，
该疫苗还可能会对抵抗力差的动物体产生严重后果，因此该疫苗在市场中已不再

应用。
（二）基于基因工程手段研制的疫苗
1. 基因缺失疫苗
近年来，随着基因编辑技术 CRISPR-Cas9 系统的成熟，该系统已广泛应
用于弓形虫基因缺失疫苗领域。钙依赖蛋白激酶（Calcium-Dependent Protein

2+
Kinases，CDPKs）是接收并传导胞外 Ca 信号的效应分子之一，是一类重要的
信号通路调控分子，广泛存在于各种植物和顶复门原虫中。弓形虫具有 14 种钙

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