Page 108 - 动物生物技术与繁殖研究

动物生物技术与繁殖研究
Research on Animal Biotechnology and Reproduction

原可以形成更多的 CTLs 表位，所以更能保护宿主抵御弓形虫感染。在 Zheng 等
的研究中，选取 TgPF、TgROP16，TgROP18、TgMIC6 和 TgCDPK3 基因制备多
基因 DNA 疫苗，因为这五种特性良好的蛋白在宿主与虫体的相互作用中起着关

键作用：MIC6 在宿主细胞与弓形虫黏附中起到关键作用；PF 与虫体滑行与侵染
有关；钙离子依赖蛋白激酶 3（Calcium-Dependent Protein Kinase 3，CDPK3）与
信号转导和虫体逸出有关；ROP18 与虫体在胞内的增殖相关；ROP16 可以调控
宿主基因表达。

研究结果表明，将这种多基因 DNA 疫苗免疫小鼠，可使小鼠产生较强的
体液和细胞免疫，与对照组小鼠相比，免疫组小鼠的总 IgG 抗体水平及 CD4 和
CD8T 淋巴细胞水平明显增高，并且抗原特异性淋巴细胞的增殖也明显增强。
促炎细胞因子 IFN-γ、IL-2 和 IL-12 分泌的增加（P ＜ 0.0001）与 NF-κB 通路

中 p65/RelA 和 T-bet 基因表达的增加有关。免疫组小鼠脑组织包囊数目显著低于
未免疫小鼠（P ＜ 0.0001），弓形虫包囊负荷减少 80.22%，表明多基因的弓形
虫 DNA 疫苗为预防慢性弓形虫感染提供了新方向。棒状体蛋白 54（ROP54）是
弓形虫的一种毒力因子，可以通过调节纳虫空泡上鸟苷酸结合蛋白 2（Guanylate

Binding Protein 2，GBP2）的数量而引起弓形虫的感染。GBP2 由干扰素（Interferon，
IFN）所诱导产生的蛋白，同时是鸟苷酸结合蛋白家族（GBPs）的成员之一，在
宿主抵抗原生动物、病毒和细菌感染方面发挥重要作用。因此，Yang 等构建了
弓形虫 ROP54 的真核重组质粒，并用该重组质粒对昆明小鼠进行了急性和慢性

的肌注免疫。所有接种 p-VAXROP54 的小鼠，Th2 型细胞因子（IL-4 和 IL-10）
和 Th1 型细胞因子显著增加（IFN-γ、IL-2 和 IL-12p70）。
研究发现，pVAX-ROP54 显著诱导了细胞和体液（Th1/Th2）免疫应答，从
而延长了生存时间（pVAXROP54 组为 13.0±1.15d，pVAXI 组为 6.7±0.48d，

PBS 组为 6.8±0.42d，空白对照组为 6.5±0.53d），并且与空白对照组相比，
显著降低了免疫小鼠的弓形虫包囊载量（pVAX-ROP54 组为 35.9%，pVAXI 组
为 1%，PBS 组为 2%）。这些结果表明，重组的 ROP54 质粒可以提供保护作用，
有望成为抗急慢性弓形虫的候选疫苗。

Fang 等研究以 SAG1 和 MIC3 两个基因作为研究对象，探究了单基因及多
基因疫苗对 BALB/c 小鼠所产生的免疫应答。实验将 96 只 BALB/c 小鼠随机分
为 8 组，每组 3 只。三个 DNA 疫苗组（pcDNAMIC3、pcDNA-SAG1、pcDNA-

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