Page 109 - 动物生物技术与繁殖研究

第四章 动物寄生虫病防控

MIC3pcDNA-SAG1），三个重组伪型杆状病毒疫苗组（BV-G-MIC3、BV-
GSAG1、BV-G-SAG-G-MIC3）和两个对照组（PBS、BVG-EGFP）。免疫两次后，
监测抗弓形虫裂解抗原（TLA）抗体和 IFN-γ、IL-4、IL-10 细胞因子水平、淋

巴细胞增殖状况及小鼠存活的时间。结果表明，以 MIC3 和 SAG1 联合基因疫苗
免疫 BALB/c 小鼠，可促进细胞免疫及体液免疫，免疫组小鼠脾细胞增殖显著高
于对照组（P ＜ 0.05），而血清中 IL-4 和 IL-10 细胞因子的水平却无显著性差异
（P ＞ 0.05），多价疫苗（BV-G-SAG1-BV-G-MIC3）相对于单价疫苗，小鼠的

存活时间延长 50%。
5.RNA 疫苗
1990 年 Wolff 等研究展现出了 mRNA 疫苗的应用前景，但由于 mRNA 进
入机体表达的过程中存在诸多困难，比如组织及细胞内含有大量的 RNA 酶会

降解 RNA，这些阻碍使得 mRNA 疫苗发展受限。但 2016 年 Chahal 等研制出一
类单剂量无佐剂 RNA 联苗，该疫苗利用树状大分子纳米颗粒，将编码弓形虫
GRA6、ROP2A、ROP18、SAG1、SAG2A 及 AMA1 蛋白的 mRNA 包被起来免
疫小鼠，结果发现：该 mRNA 疫苗免疫小鼠后可以诱导机体产生较强的细胞免

疫及体液免疫，可以对免疫小鼠产生足够的保护力，此外该 mRNA 疫苗还联合
了其他致死性病毒的抗原 mRNA（Ebola Virus，H1N1 Virus），在这些病毒攻毒
的实验中，免疫小鼠也有较高的存活率。
（三）新型疫苗

1. 纳米颗粒疫苗
纳米颗粒是指任何小于 100~1000nm 的颗粒，包括非生物原和生物原的纳
米颗粒。生物原的纳米颗粒包括寡核苷酸、多糖等，可作为病原相关分子模式
（Pathogen Associated Molecular Patterns，PAMPs）被宿主细胞上的模式识别受

体（Pattern Recognition Receptors，PRRs）所识别。由于纳米颗粒的成分与细
胞组分相近，可以通过细胞内吞的方式进入胞内。随着病毒样颗粒（Virus-like
Particles，VLPs）的出现，纳米颗粒疫苗应运而生。VLPs 疫苗多用于病毒疫苗，
对于弓形虫的 VLPs 疫苗研究甚少，在 Guo 等的研究中，将 B 细胞表位（SAG

1822 102 或 SAG 13011 320）、CD8 细胞表位（HF10 或 ROP7）和 CD4 细胞表
位（AS15）插入到截短的 HBc1（氨基酸 1-149）中，构建了四种嵌合的 VLPs 疫苗。
研究发现当这些嵌合 Hbc 颗粒在大肠杆菌中表达时，它们呈现出与原始 VLPs 相

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