Page 102 - 动物生物技术与繁殖研究
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动物生物技术与繁殖研究
Research on Animal Biotechnology and Reproduction
非特异性凝集,与其他诊断方法相比重复性较差。
(3)乳胶凝集试验(Latex Agglutination Test,LAT)
LAT 是以乳胶颗粒包被弓形虫可溶性抗原,加入待检血清后,通过观察凝集
反应进行结果判定,若结果为阳性则需要再以其他血清学方法开展进一步检查。
Patel K K 等以市售 LAT 和 ELISA 试剂检测新西兰的养殖红鹿,以此评估两者敏
感性和特异性分别为 84.4% 和 91.1%。Oi M 等利用商品化 LAT 调查了日本东京
1999—2001 年和 2009—2011 年间被收容的猫、狗的弓形虫感染血清阳性率,结
果显示十年中感染率几乎无变化(猫由 5.6% 变为 6.7%,狗由 1.8% 变为 1.9%)。
可以说,LAT 具有操作简便、结果易判及特异性良好等特点,能够快速方便地检
测到抗弓形虫 IgG 抗体,适合于动物弓形虫的早期感染和抗体检测,常作为现场
检测和大范围流行病学筛查的手段。
3. 间接荧光抗体试验(Indirect Fluorescence Antibody Test,IFAT)
间接荧光抗体试验以固定的弓形虫速殖子制作抗原片,通过荧光素标记的二
抗检测特异性抗体,具有较高的敏感性、特异性和重现性等优点,被广泛应用于
动物弓形虫血清 IgG 或 IgM 抗体的检测,是目前检测早期感染较为理想的血清
学试验方法之一。Gos M L 等通过该方法以弓形虫(RH 株)和犬新孢子虫(NC1
株)速殖子作为抗原,使用兔抗山羊 IgG-FITC 的二抗来检测阿根廷两个省山
羊的弓形虫和犬新孢子虫的感染情况,结果显示流行率分别为 40.8% 和 5.5%。
Machacova T 等使用 IFAT 发现意大利北部的兔子弓形虫和犬新孢子虫感染率分
别为 14.6% 和 1.2%。Bártová E 等对尼日利亚三个州的 120 匹马和 24 头驴进行
弓形虫和新孢子虫检测发现,马的感染率分别为 24% 和 8%;驴中仅检测到弓
形虫,血清阳性率为 17%。目前,该技术在国外广泛被应用于流行病学调查,且
已有敏感、稳定的市售试剂盒,相比之下,国内关于 IFAT 检测动物感染弓形虫
的报道较少,可能因其需要专业荧光显微镜观察而限制了该方法的推广使用。
4. 免疫层析技术(Gold Immunochromatographic Assay,GICA)
GICA 主要由标记技术和层析技术组成,利用抗原与抗体反应原理,以胶体
金作为示踪标志物,通过固相膜为载体而设计的检测方法。作为一种简单、便捷
的血清学检测方法,适于养殖场及野外现场动物弓形虫的检测。王艳等将利用弓
形虫重组抗原 SAG1 组装成胶体金免疫层析试纸条筛选犬弓形虫病,与 ELISA
试剂盒进行对比符合率较高。孙雪霏利用弓形虫重组蛋白 GRA7 制备胶体金试检
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