Page 47 - 动物生物技术与繁殖研究

第二章 病毒性动物疫病防控

荧光标记检测基因，建立一种寡核苷酸基因芯片，可用于同时检测 AIV、IBV、
NDV 和 ILTV。对 AIV 检测特异性为 100%，敏感性和 RT-PCR 相当。
上述研究证明基因芯片特异性和灵敏度均高于 RT-PCR，此外基因芯片也可

用于检测抗体。Li 等开发了一套可视化三重蛋白芯片用以检测血清样本中是否
存在 AIV、NDV 和 IBV 抗体，对 156 份血清样品的灵敏度、特异性和准确性分
别为 95.2%（99/104）、100%（52/52）和 96.8%（151/156）。王慧煜等、张思
宇等分别建立了针对 AIV 的基因芯片检测方法，检测结果与病毒分离符合率均

达 100%，为 AIV 检测和流行病学监控提供了新思路。表明基因芯片可特异、灵
敏地检测 AIV，同时基因芯片法也具有极高的准确率。总体而言，基因芯片技术
具备高特异性、高灵敏度以及高通量等优势，但该技术成本高、技术要求高，耗
时相对较长，同时可能伴有 RNA 降解等风险，不利于临床检测尤其是现场检测。

但随着基因芯片技术的完善，比如信号放大技术、可视化技术的进一步成熟，必
将成为今后 AIV 检测的重要研究方向。
4. 高通量测序
高通量测序（High Throughput Sequencing，HTS）也被称为“第二代”测

序技术，对于 AIV 的检测，只需将病毒 RNA 逆转录为 DNA，无需 PCR 扩增，
即可同时对几十万到几百万条 DNA 进行测序，已有报道可以在一次测序中完成
AIV 8 个基因序列的测定。此外，HTS 不需要提前知道待检样品基因序列，对
于 AIV 变异株或不明序列的样品可直接进行测序分析。目前使用的测序平台有

ABI、Illumina、Roche 等。由于其对设备以及分析软件等要求较高，目前主要用
于科研领域及流调分析等，在临床检测上使用并不普及。
（四）生物传感器检测方法
AIV 的检测一直在发展，现有的检测方法中，虽然像 RT-PCR、ELISA 以及

GICA 技术等已经大幅缩短了检测时间，但近年来，研究者逐渐将生物传感器视
为便捷、高效、低成本检测 AIV 的发展方向之一，已经开发多种生物传感器技
术用于检测 AIV。生物传感器是对特异性生物物质，如酶、抗体、核酸、细胞、
组织敏感，并通过一定的理化换能器如场效应管、光敏管、压电晶体等以及信号

放大器，将检测信号放大并转换为光信号、电信号、热信号或重量信号等可读的
理化信号，从而检测其组分、浓度的装置。生物传感器是一个分析系统，通常由
敏感元件、换能器和检测器三部分组成。敏感元件是关键，能够和待检物发生特

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