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动物生物技术与繁殖研究
Research on Animal Biotechnology and Reproduction

核中，这样的过程不容易产生嵌合体，更加有利于对转基因片段的分析和表达，
形成较为成功的转基因品类，目前来说，在哺乳动物中，利用显微注射法进行转
基因技术。

（二）胚胎干细胞介导法
胚胎干细胞是一种功能强大的多功能细胞，它是通过胚胎分离得到的，将胚
胎干细胞注射在动物的囊胚中，其可以与宿主的胚胎细胞结构进行有机结合，形
成嵌合体，这样其可以作为一种有效的载体结构，将外源的基因导入之后，逐步

融合在一起形成转基因动物。胚胎干细胞介导法的优势在于能够有效地整合外源
基因，其成功率能够达到一半以上，其整合效果在生殖细胞中效果较好，整合率
能够达到约三成。但是这种方法也存在一定程度的缺点，不利于形成系统的 ES
细胞系，所以经过操作生成的转基因动物都是嵌合体。只有建立有效的 ES 细胞

体系，才能够有效地保证转基因技术的成功率，达成我们的实验目标。
（三）扎刺法
扎刺法的应用过程整体速度较快，其与显微注射法所需要的设备整体较为相
似，扎刺所使用的针体较细，操作过程也更加快速、高效，在传送的过程中对于

胚胎细胞的损伤相对较小，但是在实际的使用过程中，转基因频率较低，所以实
际操作中应用较少。
（四）反转录病毒载体导入法
反转录病毒载体导入法包含两种的基本原理，第一是针对反转录病毒，当该

病毒感染宿主细胞之后，得出反转录后的 DNA 信息，同时将该 DNA 信息复制
到宿主细胞上，从而实现转基因的最终效果；第二种则是通过已连接的目的基因，
是转录的病毒进行有效的重组过程，让其感染早期胚胎或者胚胎干细胞，这样外
源的基因就进入宿主细胞当中，进而基因在宿主细胞进行有效的表达。根据这种

反转录病毒载体导入的办法，可以进行克隆，构建出多种载体，通过载体感染的
方式实现基因转移的过程，进而表达出基因形状。反转录病毒载体导入法在目前
来说是最为行之有效的办法，整体效果较好，成功率较高。其主要的优势在于整
体操作过程十分简单、便捷，不需要使用价值昂贵的科学实验设备，还能有效地

将目标基因有效的安插到宿主细胞之内，几乎不会引起基因整合位点重排的问题，
还能将基因进行有效的表达。但是这种方法也存在着一定的不足，反转录病毒载
体所能携带的基因长度是非常有限的，同时还有载体性能不稳定的情况发生，容

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