Page 41 - 动物生物技术与繁殖研究

第二章 病毒性动物疫病防控

业的人员，样品也无需处理。一般情况下，5~10min 内直接通过目测得到直观的
检测结果。
应用范围广。胶体金免疫层析技术可检测的样品多样，如体液、唾液、尿液、

全血、血浆、血清等；该技术既可以检测抗体，也可以检测抗原，目前广泛用于
生物医药、植物检疫、食品安全检测、农牧业、重金属残留检测、动物疫病诊断、
兽药残留检测等领域。
灵敏度、特异性高。该技术用高质量的单克隆抗体标记胶体金，诊断下限可

达 10pg，并且对组织细胞的非特异性吸附作用小，故其灵敏度、特异性高。
相对稳定、安全环保。胶体金免疫层析试纸条的保质期一般为 12~24 个月，
通常不需要冷藏。试剂比较稳定，检测结果能长时间保存于室温；无邻苯二胺等
有害物质的参与，不会影响操作人员的健康，也不会污染环境。

经济实用，便于运输。该试纸条检测时所需的试剂和样本用量少，其中样本
用量低至 1~2mL。同时该试纸条体积小，方便运输。
胶体金免疫层析技术的分类：胶体金免疫层析技术根据其原理的不同，可
分为间接法、夹心法和竞争法。其中，夹心法又分为双抗原夹心法和双抗体夹心

法。间接法大多用于检测抗体，常用于病毒或细菌相应血清抗体的检测；竞争法
多用于检测仅含有一个免疫结合位点的小分子抗原，如吗啡；双抗体夹心法多用
于检测多表位抗原，常应用于病毒的检测；双抗原夹心法多用于对病原相应抗体
的检测

在 10min 内可完成 1 次检测，广泛用于动物疾病的快速诊断。Sun 等通过识
别 H7N9 AIV 第 227 和 235 位氨基酸表位的单克隆抗体开发了一种胶体金试纸，
对拭子和组织样品的检出限为 102.5EID50/0.1mL。Li 等制备了 H7N9 AIV 单克
隆抗体 10A8 与胶体金偶联作为检测抗体，单克隆抗体 9B6 则固定在 NC 膜作为

捕获抗体，山羊抗小鼠 IgG 抗体作为对照抗体，制备了检测 H7N9 AIV 的胶体
金免疫层析试纸条，可在 10min 内特异检测 H7 亚型 AIV，对拭子样品检测限达
102.4EID50/0.1mL。Han 等从数据库筛选分析了 13 篇有关免疫层析检测 AIV 的
文章，发现免疫层析的综合敏感性和特异性分别为 85% 和 97%，表明其可以作

为一种快速诊断 AI 的方法。胶体金免疫层析凭借其快速简便的优点，成为当前
现场检测 AIV 的常用方法，但其灵敏度较低，易导致漏检。该方法可以用于大
量样品筛查，但不适合用于 AIV 的精准检测。

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